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采集微生物高倍顯微鏡標(biāo)本

時(shí)間:2022-09-05 14:20:31 來(lái)源: 點(diǎn)擊:

  微生物高倍顯微鏡的標(biāo)本采集必須經(jīng)過(guò)一定的提前準(zhǔn)備全過(guò)程,才能在顯微鏡下產(chǎn)生清晰的圖像。在出口照明燈和散射照明燈中,標(biāo)本采集的電子光學(xué)規(guī)定有很大的區(qū)別。出口照明燈具的誹謗是由標(biāo)本采集的折射光產(chǎn)生的;相反,在進(jìn)口照明燈具中,保護(hù)是由散射光產(chǎn)生的。在這種情況下,折射光不僅不利于圖像的產(chǎn)生,而且會(huì)降低圖像的圖像質(zhì)量。

  對(duì)于入射角觀察的標(biāo)本采集,其準(zhǔn)備工作非常簡(jiǎn)單,只是將標(biāo)本采集的表面清理干凈,用激光將其切割成一小塊,尺寸適中。用散射光觀察的標(biāo)本采集必須有一定的吸光差距,才能在顯微鏡下觀察。因此,標(biāo)本采集必須經(jīng)歷一系列復(fù)雜的解決方案和整個(gè)制作過(guò)程,這種制作技術(shù)是普遍的

  常說(shuō)生物顯微鏡技術(shù)。

  從電子光學(xué)的角度來(lái)看,采集散射光觀察光學(xué)顯微鏡樣本有以下規(guī)定:

  (1)適度薄厚。這種薄厚度在良好的光學(xué)電子系統(tǒng)中可以達(dá)到盡可能高的分辨率,并且與該系統(tǒng)軟件的場(chǎng)探相一致。

  (2)清晰度充足。

  (3)在消化吸收差異上創(chuàng)造足夠的差距。

  事實(shí)上,所有的分子生物原料都是按照石措包埋、切片(或玻璃片)、粘貼、溶解蠟、完全透明等全過(guò)程,在厚度和清晰度上符合規(guī)定的標(biāo)本可以收集,然后根據(jù)著色過(guò)程得到一定的差距。

  分子生物學(xué)和醫(yī)學(xué)組織切片一般用于散射生物顯微鏡,其厚度一般為3-7-7μm。在這一薄厚范疇中,應(yīng)使用高倍物鏡(例如10×)觀察時(shí),場(chǎng)地深度全部切成薄片,厚度完全充足;應(yīng)用高信物鏡(如100×)觀察時(shí),場(chǎng)深只是這片薄片厚度的一小部分(圖16.8),不斷從上到下移動(dòng),細(xì)調(diào)可以得到切片的整體印象。因而,5—7μm厚的基本切片可以感覺(jué)到是在低變大倍率和高變大倍率的理想化狀態(tài)之間的調(diào)合,兩者都很好的考慮到了到來(lái)的深度和分辨率。此外,由于各種原因,這種混合的厚度也考慮了具體工作的許多規(guī)定。第一個(gè)物體的微小結(jié)構(gòu)并不總是第一個(gè);其次是太薄(1-2μm)微生物標(biāo)本采集中的立體關(guān)聯(lián)在切片中是看不到的;此外,當(dāng)應(yīng)用8-10時(shí)μm或者在切割較厚的薄片時(shí),除了在分辨率上可以發(fā)現(xiàn)的損傷外,還會(huì)導(dǎo)致微生物標(biāo)本采集中不同層次的重合。

  固定、埋、切片、溶解蠟、完全透明等解決后,動(dòng)植物原料標(biāo)本采集足夠薄、完全透明,但差距不大,這種差距的關(guān)鍵來(lái)自映射和透射。顯然,這種標(biāo)本采集的差距遠(yuǎn)遠(yuǎn)不理想。然而,這可以根據(jù)減少映射的實(shí)際效果來(lái)覆蓋它“消化吸收化學(xué)物質(zhì)”并根據(jù)消化吸收的差異擴(kuò)大差距。標(biāo)本采集與周圍區(qū)域之間的映射可以根據(jù)澳大利亞樹(shù)木或其他人工密封材料中標(biāo)本采集和密封的方式減少。在所有這些密封材料蒸發(fā)或聚集硬化后,其折射率接近固定或干燥動(dòng)物和植物機(jī)構(gòu)的主要成分。在大多數(shù)動(dòng)植物機(jī)構(gòu)中,這個(gè)標(biāo)記值為1.5l1.54。另外,這種方法還可以去除蓋玻片下反射面引起的閃光。

  它已經(jīng)在新世紀(jì)中使用了一個(gè)多世紀(jì),最有效的方法是給生物顯微鏡標(biāo)本產(chǎn)生良好的差距。一般來(lái)說(shuō),沒(méi)有顏色的微生物標(biāo)本的收集,特別是當(dāng)放置在類似于微生物標(biāo)本收集的折射率距。在著色標(biāo)本采集中,圖像差距的擴(kuò)大是基于染料的選擇性。著色和未著色標(biāo)本采集之間存在很大差異。

  微生物切片通常粘在26×76mm標(biāo)準(zhǔn)尺寸和1.1—1.在3毫米厚的切割件上,切割件的雙面應(yīng)為平行平面圖。關(guān)于厚部件厚度的規(guī)定不是很嚴(yán)格,但當(dāng)其厚度超過(guò)一些高度修正水平集光器的自由工作間距時(shí),對(duì)于聚焦點(diǎn)光源及其在物體平面圖上產(chǎn)生愿望光源圖像越來(lái)越重要。對(duì)于這種情況,厚度為0.9—1.0Mm裁裝片比較合適。關(guān)于蓋玻片的第三章已經(jīng)說(shuō)過(guò)了,這里已經(jīng)不再重復(fù)了。

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