顯微鏡的光學(xué)性能參數(shù)包括:數(shù)值孔徑、分辨率、放大率、焦點(diǎn)深度、視場(chǎng)總寬度、覆蓋率差、工作距離等。這些參數(shù)并不總是越高越好,它們是相互依存的
相互制約,在使用時(shí),參數(shù)之間的關(guān)系應(yīng)根據(jù)鏡檢的目的和實(shí)際情況進(jìn)行協(xié)調(diào),但應(yīng)以保證分辨率為準(zhǔn)。
一、數(shù)值孔徑
簡(jiǎn)寫數(shù)值孔徑NA,數(shù)值孔徑是物鏡和聚光鏡的主要性能參數(shù),是判斷兩者(特別是物鏡)性能的重要標(biāo)志。其值的大小在物鏡和聚光鏡中分別為
外殼上。
數(shù)值孔徑(NA)它是物鏡前鏡片和被檢物體之間的介質(zhì)折射率(h)和孔徑角(u)半數(shù)正玄相乘。以下公式表示:
NA=hsinu/2
孔徑角又稱“鏡嘴角”它是由物鏡光軸上的物體點(diǎn)和物鏡前鏡頭的有效直徑產(chǎn)生的角度??讖浇窃酱螅M(jìn)入物鏡的光越亮,與物鏡的有效直徑成正比,與焦點(diǎn)的距離成反比。
在觀察顯微鏡時(shí),如果你想增加NA值,孔徑角不能增加,唯一的方法就是增加介質(zhì)的折射率h值?;谶@一原理,由于介質(zhì)映射,產(chǎn)生了水浸物鏡和油浸物鏡
比率h值大于一,NA這個(gè)值可以大于一個(gè)。.4.這個(gè)值在理論和技術(shù)上都達(dá)到了極限。目前,溴萘作為介質(zhì)具有高折射率,溴萘的折射率為1.66,因此NA值可大于1.4。
這里必須指出的是,為了充分發(fā)揮物鏡數(shù)值孔徑的作用,在觀察過程中,聚光鏡的作用是NA值應(yīng)等于或略大于物鏡NA值,值孔與其他性能參數(shù)密切相關(guān),它幾乎決定并影響其他性能參數(shù)。它與分辨率、放大率和焦點(diǎn)深度成正比,NA隨著價(jià)值的增加,視場(chǎng)總寬度和工作距離都會(huì)相應(yīng)變小。
二,分辨率
分辨率又稱“辨別率”,“解像力”。是檢驗(yàn)顯微鏡特性的另一個(gè)重要性能參數(shù)。
顯微鏡的分辨率用公式表示:d=l/NA
最小區(qū)分距離為d;
1為光的波長;
NA物鏡的數(shù)值孔徑。
可見物鏡的分辨率由物鏡決定NA兩個(gè)因素決定了光源的值和波長。NA值越大,照明光源波長越短,d值越大,分辨率越高。
為了提高分辨率,即降低d值,可采取以下措施:
1.利用短波長燈源降低波長I值。
2.曾大介質(zhì)h值和提升NA值(NA=hsinu/2).
3.增加孔徑角。
4.增加明暗反差。
三,放大率
放大率是放大率,是指檢測(cè)到的物體通過物鏡放大,然后通過目鏡放大,人眼看到的最終圖像大小與原物體大小的比率,是物鏡和目鏡放大率的乘數(shù)。
放大率也是顯微鏡的一個(gè)重要參數(shù),但也不能盲目相信放大率越高越好,在選擇時(shí)首先要考慮物鏡的數(shù)值孔徑。
四,焦深
聚焦深度是聚焦深度的簡(jiǎn)稱,即使用顯微鏡時(shí),當(dāng)聚焦對(duì)準(zhǔn)物體時(shí),不僅可以看到該點(diǎn)平面上的所有點(diǎn),而且可以看到該平面上下的一定厚度
很明顯,這個(gè)清晰的部分的厚度是焦深。焦深大,可以看到被檢查物體的整個(gè)層,而焦深小,只能看到被檢查物體的層分析,焦深與其他性能參數(shù)有以下關(guān)系:
1.焦深與總放大倍數(shù)和物鏡的數(shù)值孔鏡成反比。
2.分辨率降低。
五、視場(chǎng)直徑(Fieldofview)
在觀察顯微鏡時(shí),看到的明亮原型范圍稱為視場(chǎng),其大小由目鏡中的視場(chǎng)光闌決定。
視場(chǎng)直徑,也稱為視場(chǎng)總寬度,是指在顯微鏡下看到的圓形視場(chǎng)中能夠容納被檢物體的實(shí)際范圍。視場(chǎng)直徑越大,觀察就越方便。
從公式可以看出:
1.視場(chǎng)直徑與視場(chǎng)數(shù)成正比。
2.增加物鏡的倍率,降低視場(chǎng)直徑。
所以,如果能在低倍鏡下看到被檢物體的全貌,而改為高倍鏡,只能看到被檢物體的一小部分。
六,覆蓋差
顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)還包括覆蓋玻璃。由于覆蓋玻璃的厚度不標(biāo)準(zhǔn),光源從覆蓋玻璃進(jìn)入氣體后的光路發(fā)生變化,導(dǎo)致差異,即覆蓋差。覆蓋不良影響顯微鏡的聲音質(zhì)量。
根據(jù)國際規(guī)定,蓋玻片的標(biāo)準(zhǔn)厚度為0.17mm,許可范圍在0.16-0.18mm.,在物鏡的制造中,這個(gè)薄厚范圍的差值已經(jīng)計(jì)算在內(nèi)。物鏡外殼上的標(biāo)記確實(shí)是0.17、表示物鏡需要蓋玻片的厚度。
七、工作距離
工作距離,也稱為物體距離,是指物鏡前透鏡表面與被檢查物體之間的距離。在鏡檢過程中,被檢查物體應(yīng)在物鏡焦距的兩倍至兩倍之間。因此,它和焦距是兩個(gè)概念
其實(shí),調(diào)焦的習(xí)慣就是調(diào)整工作距離。
在物鏡數(shù)值孔徑一定的情況下,工作距離短,孔徑角度大。高倍物鏡,孔徑大,工作距離小。